細菌處于容易接受外源DNA的狀態(tài)稱(chēng)之為感受態(tài)，通過(guò)物理或化學(xué)的方法，人工誘導細菌細胞成為敏感的感受態(tài)細胞是重組DNA轉化細菌技術(shù)的關(guān)鍵。制備出感受態(tài)細胞，我們就可以方便的將需要克隆的質(zhì)粒導入其中，使其繁殖，從而獲得大量的質(zhì)粒。CaCl₂轉化法是常用的感受態(tài)細胞制備方法，其制備流程簡(jiǎn)單，快捷，成本低，并且能夠滿(mǎn)足普通的轉化和克隆的需求。

      判斷感受態(tài)細胞制備的優(yōu)劣主要是通過(guò)轉化效率來(lái)檢測。經(jīng)轉化外源質(zhì)粒DNA的大腸桿菌在含抗性的LB平板過(guò)夜培養后，平板上長(cháng)滿(mǎn)克隆且陰性對照（未轉入外源DNA的感受態(tài)）沒(méi)有克隆，證明感受態(tài)細胞制備良好。

注意事項：

1、在制備感受態(tài)細胞過(guò)程中，所有用到的耗材，試劑均要求無(wú)菌，操作過(guò)程也要求*按照無(wú)菌操作進(jìn)行，避免雜菌及污染。

2、制備感受態(tài)的菌株最好是先將甘油菌劃線(xiàn)于無(wú)抗性的LB平板中進(jìn)行活化，然后挑選單克隆的液體培養基中培養。如果甘油菌溶解后直接在液體培養基中培養來(lái)制備感受態(tài)，會(huì )影響感受態(tài)細胞的活性。

3、在制備感受態(tài)細胞的過(guò)程中，保持各環(huán)節處于低溫環(huán)境，4℃離心，冰上重懸，CaCl₂溶液置于冰浴中，以保證感受態(tài)細胞的轉化效率。

4、重懸細胞時(shí)，盡量避免吹打細胞造成細胞損傷，通過(guò)輕輕震蕩使細胞重懸，減少對菌株的損傷從而影響其活性。

5、制備好的感受態(tài)細胞應盡快使用，存放過(guò)久會(huì )影響其轉化效率。

6、感受態(tài)細胞不宜反復凍融，因為凍融過(guò)程中產(chǎn)生的冰晶會(huì )對細菌細胞造成傷害。

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